Visualizzazione

La rilevazione dell'espressione di PD-L1 con il clone SP263 utilizza l'immunoistochimica per visualizzare la proteina PD-L1 su sezioni tumorali fissate alla formalina e incorporate alla paraffina.L' anticorpo SP263 è un reagente monoclonale per conigli sviluppato per la piattaforma di colorazione automatizzata VENTANA, e serve come diagnostico di accompagnamento che aiuta a determinare l'idoneità per diversi inibitori del punto di controllo immunitario.La comprensione del principio del test chiarisce perché i risultati sono riportati come una percentuale di cellule colorate piuttosto che una semplice chiamata positiva o negativa.

Il principio della macchia

Il metodo inizia con l' applicazione dell' anticorpo anti-PD-L1 su una lamina di tessuto sottile, dove si lega alla proteina PD-L1 espressa sulla membrana cellulare.Un sistema di rilevamento secondario deposita poi un cromogeno che rende i siti legati come una macchia marrone visibile sotto il microscopioPoiché il PD-L1 si trova sulla superficie cellulare, il punteggio si concentra sulla colorazione della membrana e l'intensità viene interpretata in base a soglie convalidate piuttosto che stimata solo con l'occhio.

Leggere il punteggio della proporzione del tumore

I patologi valutano la percentuale di cellule tumorali vitali che mostrano una colorazione parziale o completa della membrana, un approccio noto come punteggio della proporzione del tumore.Diverse indicazioni diagnostiche di accompagnamento utilizzano limiti differenti: ad esempio, l' atezolizumab nel cancro polmonare non a piccole cellule è associato a una soglia di almeno l' uno per cento di colorazione delle cellule tumorali,mentre cemiplimab in alcune indicazioni utilizza una soglia più elevata di cellule tumoraliLo stesso test SP263 può quindi supportare più decisioni di immunoterapia a seconda della regola di punteggio validata applicata.

Perché la scelta dei cloni è importante

I test PD-L1 non sono intercambiabili, perché ogni clone di anticorpo riconosce un epitopo leggermente diverso e ogni piattaforma ha la propria chimica di colorazione.I laboratori dovrebbero riferire l'esatto clone e l'algoritmo di punteggio utilizzato in modo che il medico possa abbinare il risultato all'etichetta corretta del farmacoUn flusso di lavoro chiaramente documentato e standardizzato protegge il significato clinico del punteggio tra i siti.

Fattori preanalitici che influenzano il punteggio

La qualità del campione influenza fortemente il punteggio PD-L1. La fissazione troppo lunga o troppo breve può alterare la ritenzione dell'antigene della membrana e un basso contenuto tumorale lascia troppe cellule per punteggiare in modo affidabile.I laboratori devono definire i tempi di fissazione accettabili e l' area minima del tumore prima della colorazione.Un risultato riportato con il suo contesto pre-analitico è molto più affidabile di un numero rilasciato senza riserve.

Domande frequenti

D:Cosa misura effettivamente SP263?A:Misura la proteina PD-L1 sulle membrane cellulari in una sezione di tessuto mediante immunoistochimica cromogenica, espressa come percentuale di cellule tumorali colorate.

D:Tutti i test PD-L1 sono intercambiabili?A:No, i diversi cloni e le diverse piattaforme di anticorpi sono convalidati separatamente, quindi la regola di clonazione e punteggio riportata deve corrispondere alla terapia prevista.

D:Perché il risultato è una percentuale piuttosto che un sì o un no?A:Le richieste diagnostiche di accompagnamento sono legate a soglie proporzionali, quindi il punteggio deve riflettere il numero di cellule tumorali che esprimono il marcatore.